鱘魚細(xì)菌性敗血癥的診斷與治療
2000年9月,河南信陽(yáng)和厚特種水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)土池飼養(yǎng)的俄羅斯鱘(Acipenser guelden staedti)、雜交鱘(bester)暴發(fā)生細(xì)菌性敗血癥,由于診斷及時(shí),采取措施有效,很快控制了病情,現(xiàn)將診療情況報(bào)告如下。
1 發(fā)病情況
1999 年11月4日-2000年1月22日購(gòu)進(jìn)體重45-110g的俄羅斯鱘8160尾、雜交鱘11580尾,放養(yǎng)在7口面積4畝、水深0.5-1.0米的新開控土池中,放養(yǎng)量705尾-畝。2000年4月3日清塘分池,成活率85.3%,經(jīng)抽檢魚體尾重120-300克,平均176克;分池放養(yǎng)量為300尾/ 畝;同時(shí),每畝搭配放養(yǎng)10-15厘米的白鰱500尾。9月3日抽檢,鱘魚尾重600-800克,平均683克。9月11日4號(hào)池雜交鱘突然發(fā)病死亡30 余尾,12月5號(hào)池也出現(xiàn)死亡,兩池共死亡150余尾,13日波及8號(hào)池俄羅斯鱘,當(dāng)日三池死亡270余尾,14日上午到我校尋求幫助,15日采取治療措施,20日停止死魚。此次發(fā)病共死亡鱘魚1820余尾;發(fā)病率約80%,死亡率15%;而同池飼養(yǎng)的白鰱并未見發(fā)病。
2 臨床病理變化
鱘魚發(fā)病后,吃食量急劇下降,攝食量從發(fā)病前的每千克魚攝食22克下降到8-10克(干重)。體外檢查,病魚腹部、嘴四周、眼睛、硬鱗基部出血,個(gè)別病魚尾柄硬鱗基部有突出體外的充血泡;肛門紅腫;鰓顏色較淡,個(gè)別呈花斑狀。剖檢腹腔內(nèi)有淡紅色混濁用水;肝腫大呈土黃色,剖面有肉眼可見之油珠,個(gè)別病魚肝有灰白色點(diǎn)狀彌散壞死病灶;腸系膜、脂肪組織、生殖腺及腹壁有出血斑點(diǎn);腸內(nèi)多無(wú)食物,腸壁 及中腸以后部位螺旋瓣充血,后腸充滿泡沫狀粘液物質(zhì)。病魚行動(dòng)遲緩,對(duì)外界刺激敏感性大大下降低,甚至失去反應(yīng),呼吸困難,浮在岸邊水面不動(dòng),死前多發(fā)生陣發(fā)性狂游掙扎,最后衰竭而亡。
3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)
取病魚肝組織印片作革蘭氏染色鏡檢,結(jié)果印片有許多革蘭氏陰性短桿菌,判斷病魚死亡可能由細(xì)菌感染所引發(fā)。
3.1 病原分離 無(wú)菌取病魚肝、腎組織劃線接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板和兔血營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板。在37℃,經(jīng)18hr培養(yǎng),兩種平板上出現(xiàn)圓形、淡黃色、邊緣整整齊、生長(zhǎng)良好且較純一的菌落,在免血營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上呈β型溶血。
3.2 分離培養(yǎng)和生理生化鑒定 將上述免血瓊脂平板37℃培養(yǎng)物挑取單個(gè)菌落接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,37℃培養(yǎng)24hr做純培養(yǎng)。經(jīng)生理生化鑒定,結(jié)果見表 1。參考《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌鑒定手冊(cè)》中氣單胞菌屬的特性,將分離菌定為嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)。
3.3 動(dòng)物試驗(yàn) 將純培養(yǎng)物接種普通內(nèi)湯37℃培養(yǎng)18hr,取肉湯菌液0.2ml腹腔注射18-20克小白鼠4只,另設(shè)2只為對(duì)照組注射無(wú)菌肉湯。結(jié)果試驗(yàn)組小鼠48hr內(nèi)死亡,對(duì)照組小鼠觀察至15日仍正常。用最小致死劑量檢測(cè)分離菌株的毒力大小,結(jié)果對(duì)小鼠的MLD為2.0億個(gè)細(xì)菌。
3.4 藥敏試驗(yàn) 采用常規(guī)紙片法,置37℃培養(yǎng)12hr觀察,結(jié)果見表3。
4 治療措施及效果
由于病原體對(duì)水體的污染和魚的感染都比較嚴(yán)重,因此,我們采取了換水消毒和內(nèi)服藥物治療相結(jié)合的綜合措施,具體方法如下:
4.1 換水消毒 先用“克暴靈”全池潑灑消毒,劑量為25ml/畝.米,并同時(shí)消毒蓄水池;然后排水、注水。24hr后全場(chǎng)所有水體用0.1ppm呋喃酮消毒。3日后再消毒一次。
4.2 內(nèi)服治療 每100kg魚每天用恩諾沙星2.0g拌餌,分四次投喂,6天為一個(gè)療程。
4.3 治療效果 喂藥一個(gè)療程,病情鄧得到控制,死亡停止,水面也不再有浮起的病魚,食欲明顯提高,從治療前每千克魚食8克飼料提高到16克。隨機(jī)抽檢,魚腹部、嘴四周、眼睛、硬磷基部出血癥狀消失。
為了鞏固療效,徹底根治該病,以內(nèi)服藥為主進(jìn)行了第二個(gè)療程的治療,并將恩諾沙星換成呋喃唑酮,劑量不變。第二個(gè)療程結(jié)束,每千克魚攝食增加到20克,食欲基本恢復(fù)正常。
5 小結(jié)與討論
5.1根據(jù)臨床表現(xiàn),病理變化和細(xì)菌學(xué)檢查結(jié)果,可以判定這是一起由嗜水氣單胞菌引發(fā)的鱘魚敗血癥。我們采取換水消毒,在飼料中汪厙恩諾沙星、呋喃唑酮治療,有效地控制了鱘魚的大量死亡。
鱘魚類的商品養(yǎng)殖在國(guó)內(nèi)剛剛起步,有關(guān)其病害研究資料極少。據(jù)報(bào)道,曾在史氏鱘幼魚(體重小于150克)中發(fā)現(xiàn)由氣單細(xì)菌引起的出血病,具有極強(qiáng)的傳染性,發(fā)病迅猛,死亡率高。而600克以上鱘魚發(fā)生大規(guī)模且造成較大經(jīng)濟(jì)損失的嗜水氣單胞菌敗血癥尚屬首例,這提本我們?cè)邝\魚集約化養(yǎng)殖生產(chǎn)中重視預(yù)防為主是極為重要的。
5.2 嗜水氣單胞菌在自然界尤其水體中廣泛分布,其宿主也十分廣泛,對(duì)蝸牛、蛙、蛇、各種魚類和哺乳動(dòng)物有致病情,但對(duì)魚類的致病性一般認(rèn)為是條件性的,是否發(fā)病則取決于細(xì)菌——魚——環(huán)境三方面相互作用的結(jié)果。在土池中飼養(yǎng)鱘魚,如果經(jīng)常更換飼料,換水措施不力,遇連綿陰雨天氣時(shí)水質(zhì)就易于惡化,有利于嗜水氣單胞菌的繁殖和毒力增強(qiáng),而不利于底棲性鱘魚的生長(zhǎng),使鱘魚抗病力下降,從而易于感染而發(fā)病。雖然用藥物能控制該病,但是經(jīng)常用藥會(huì)使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性,因此對(duì)鱘魚細(xì)菌性敗血癥的防治應(yīng)著眼于平時(shí)的綜合預(yù)防上,要保持水質(zhì)的清潔,堅(jiān)持定期換水,經(jīng)常改良水質(zhì),同時(shí)加強(qiáng)科學(xué)飼養(yǎng)管理,投喂?fàn)I養(yǎng)豐富的全價(jià)飼料,增強(qiáng)魚體的抗病力。
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