概述

雜交鮑魚，與皺紋盤鮑無大差異，其外殼呈翠綠色，皺紋突起明顯，呼吸孔多，生長(zhǎng)紋明顯。雜交鮑有效的提高了子代的抗逆性。成活率提高6-7倍，生長(zhǎng)周期縮短了一年，越冬成活率提高到90%，生長(zhǎng)速度提高30%，攝食量提高了70%。在5000m2水面中，出苗量5000頭/ m2 ，成活率達(dá)90%以上。分布于中國(guó)北部沿海，山東、遼寧產(chǎn)量較多，其中山東的威海、長(zhǎng)島，遼寧的金縣、長(zhǎng)山島產(chǎn)量最多。產(chǎn)季多在夏秋季節(jié)。鮑肉肥美，為海產(chǎn)中的珍品，多供應(yīng)高級(jí)賓館和出口。除鮮食外，亦可加工成罐頭或鮑魚干，售價(jià)均昂貴。鮑貝殼即有名的中藥石決明，又是制作貝雕畫的重要材料。

“大連1號(hào)”雜交鮑魚

由中國(guó)科學(xué)院海洋研究所張國(guó)范課題組主持研究的“大連1號(hào)”雜交鮑由全國(guó)水產(chǎn)原種和良種審定委員會(huì)審定為國(guó)家級(jí)新品種。國(guó)家農(nóng)業(yè)部為該品種頒發(fā)了新品種證書，認(rèn)定其為適宜推廣的雜交新品種，可在人工可控的水體中養(yǎng)殖。“大連1號(hào)”雜交鮑是我所培育的第一個(gè)國(guó)家級(jí)動(dòng)物新品種，也是我國(guó)第一個(gè)通過審定的海水貝類新品種。

“大連1號(hào)”雜交鮑魚是利用皺紋盤鮑日本巖手群體和大連群體雜交形成的雜交種。該雜交種雜種優(yōu)勢(shì)明顯，性狀穩(wěn)定，具有適應(yīng)性廣、成活率高、抗逆性強(qiáng)、生長(zhǎng)快、品質(zhì)好等特點(diǎn)。與父母本比較，生長(zhǎng)速度平均提高20%以上，成活率提高1.8 - 2.3倍，適宜水文0-29℃。與非雜交鮑魚相比較適溫上限提高了4-5℃，使雜交鮑養(yǎng)殖區(qū)海域從渤海和黃海北部向福建和廣東北部海域擴(kuò)展，養(yǎng)殖區(qū)域進(jìn)一步擴(kuò)大，經(jīng)濟(jì)效益將更加顯著。

日本盤鮑與皺紋盤鮑雜交育種技術(shù)研究

目前皺紋盤鮑養(yǎng)殖生產(chǎn)中出現(xiàn)很多問題，突出表現(xiàn)為種質(zhì)嚴(yán)重退化，養(yǎng)成周期長(zhǎng)，成活率低，抗病力差，尤其是近幾年稚鮑病毒性和細(xì)菌性疾病大面積蔓延，造成稚鮑大批死亡，嚴(yán)重影響了鮑養(yǎng)殖生產(chǎn)的持續(xù)發(fā)展。分析原因，主要是過去人工育苗所采用的種鮑往往來自同一海區(qū)，經(jīng)多年繁衍，其親緣關(guān)系越來越近，產(chǎn)生近交衰退，造成種質(zhì)嚴(yán)重退化。因此，要使鮑養(yǎng)殖業(yè)得到穩(wěn)步發(fā)展，就要搞好種質(zhì)的優(yōu)化復(fù)壯。而利用雜交技術(shù)進(jìn)行種質(zhì)改良，培育出性狀穩(wěn)定、生長(zhǎng)快、抗病力強(qiáng)的鮑是這一產(chǎn)業(yè)的關(guān)鍵所在。利用日本盤鮑(haliotis)與本地皺紋盤鮑(H.discus hannai)進(jìn)行雜交育種技術(shù)研究取得了較好效果。研究情況總結(jié)如下：

1材料與方法

1.1材料

1.1.1親鮑來源

1999年1月下旬從大連長(zhǎng)海縣購(gòu)進(jìn)皺紋盤鮑親鮑1000頭，規(guī)格8cm以上，其中雌鮑450頭，雄鮑550頭。1999年2月13日從大連市水產(chǎn)研究所購(gòu)入日本盤鮑親的50頭，規(guī)格10cm以上，其中雌鮑22頭，雄鮑28頭.2000年1月20日從青島購(gòu)進(jìn)皺紋盤鮑1500頭規(guī)格8cm以上，其中雌鮑980頭，雄鮑520頭。2000年1月15日從日本青森縣購(gòu)進(jìn)日本盤鮑親的120頭，規(guī)格8.5cm，其中雌鮑58頭，雄鮑62頭。

1.1.2餌料

幼體培育用底棲硅藻和人工配合餌料，海上養(yǎng)成用鮮海帶、裙帶萊等。

1.1.3試驗(yàn)設(shè)備

刺激鮑產(chǎn)卵排精用的30w石英 紫外線燈管、水槽及采苗板。稚鮑中間培育用的網(wǎng)箱、黑色波紋板。養(yǎng)成用的海上筏架、養(yǎng)鮑籠等。

1.2方法

1.1.2餌料培育

先將培育池、采苗板洗刷干凈消毒，于前1年的11月份接種底棲硅藻，并逐步擴(kuò)大培養(yǎng)，到第2年4月初擴(kuò)大接種結(jié)束。每日換水2—3次，每次1/2～/3，水溫保持10～15℃，定期施肥(結(jié)合換水進(jìn)行)，氮、磷比為10∶1，適量補(bǔ)施鐵、硅肥等。為防止大型硅藻繁生，光照調(diào)在2500～3000lx范圍內(nèi)。定期倒轉(zhuǎn)采苗板方向，以促進(jìn)餌科均勻繁殖生長(zhǎng)。當(dāng)采苗板上出現(xiàn)撓足類繁殖，在培養(yǎng)池中加1～2×10-6的敵百蟲捕殺干凈。

1.1.2親鮑貯養(yǎng)促熟

親鮑自2月初入池促熟，培育密度30—50個(gè)/m3，親鮑入池后每天升溫1～1.5℃，升至20℃恒溫促熟，待產(chǎn)。每天全量換水1次，換水溫差不超過0.5℃，后期不超過0.3℃，并結(jié)合清除污物，糞便觀察性腺發(fā)育情況。每天上午換水結(jié)束后投入新餌料，以新鮮海帶為主，每天投喂量一般按親鮑體重的30%，同時(shí)結(jié)合水溫及攝食情況隨時(shí)加以調(diào)整。為了改善水質(zhì)，增加溶解氧，形成水流，有利于性腺的發(fā)育，促熟期間需要全天連續(xù)充氣，充氣量不少于1m3/小時(shí)。鮑具有背光性，暗光或黑暗狀態(tài)對(duì)親鮑的攝食、活動(dòng)有利，故一般光照控制在100lx以下。要保持室溫恒定，當(dāng)有效積溫達(dá)到300~400℃時(shí)，挑出雌、雄鮑，分別促熟暫養(yǎng)，每天做好有效積溫和攝食記錄。

1.2.3采卵、受精、孵化

1999年4月12日，貯養(yǎng)的皺紋盤鮑在有效積溫達(dá)800℃時(shí)自然產(chǎn)卵，日本盤鮑在有效積溫達(dá)到1250℃時(shí)，經(jīng)人工刺激后排精。5月3日通過人工刺激，促使皺紋盤鮑和日本盤鮑分別產(chǎn)卵、排精，進(jìn)行正向雜交。5月15日和6月2日亦以刺激法誘導(dǎo)日本盤鮑和皺紋盤鮑產(chǎn)卵、排精，進(jìn)行反向雜交。將采集的卵子集中定量，待卵下沉后排掉上層清水，然后按每個(gè)卵子10000個(gè)左右精于加入受精，邊加精邊攪動(dòng)海水，半分鐘受精結(jié)束，用新鮮過濾海水洗卵數(shù)次，以除去多余精子。然后，將受精卵移入孵化池，放卵密度為20～30個(gè)/ml，在胚體上浮前每6～8小時(shí)換水1次，每次3/4，水溫保持18～20℃。

1.2.4采苗、稚鮑前期培育

將后期面盤幼體每筐架投放1萬(wàn)～l.5萬(wàn)個(gè)，3天后附著結(jié)束，附苗率為30%左右，平均每張采苗板附著量為200～300個(gè)。稚鮑前期培育確保水質(zhì)優(yōu)良，每天換水3次，每次的交換量為培育水體的8倍以上，前期水流要緩，待全部附著后適當(dāng)增加流量。水溫為18～20℃。為使底棲硅藻不斷增殖，以保證幼鮑餌料供應(yīng)，每天清晨結(jié)合換水施以氮1×10-6、磷0.1×10-6。光照控制在1500～3000lx。

1.2.5稚鮑后期培育

附苗后35天左右，稚鮑規(guī)格達(dá)2～3mm時(shí)，逐步剝離并轉(zhuǎn)移到網(wǎng)箱培育。剝離方法用2%的酒精海水麻醉法。剝離后，1天24小時(shí)常流水，流水量為10個(gè)量程以上。投人工配合餌料，每天傍晚前投喂1次，投喂量根據(jù)稚鮑攝食情況隨時(shí)調(diào)整。每天清晨堅(jiān)持清污，除去殘餌和死苗，定期倒池，洗刷網(wǎng)箱。稚鮑人箱后約2個(gè)月以上，平均殼長(zhǎng)9mm左右，由于個(gè)體間出現(xiàn)較大差異，此時(shí)進(jìn)行剝離篩選分級(jí)，選用2級(jí)網(wǎng)目的篩網(wǎng)，1次分離出3種體長(zhǎng)規(guī)格，將大、中、小個(gè)體分開單獨(dú)飼養(yǎng)。

1.2.6鮑的中間育成

當(dāng)年11月份水溫6～8℃，剝離篩選殼長(zhǎng)<1cm、殼長(zhǎng)1～1.5cm和1.5～2cm、2～2.5cm以及3cm以上5種規(guī)格，進(jìn)行室內(nèi)水泥池越冬中間育成。中間育成密度與鮑苗大小有關(guān)：殼長(zhǎng)<1cm，中間育成密度3000～4000個(gè)/m2;殼長(zhǎng)1～1.5cm，密度2000～2500個(gè)/m2;殼長(zhǎng)1.5～2cm，密度為1000～1500個(gè)/m2;殼長(zhǎng)2～2.5cm，密度為750～1000個(gè)/m2;2.5cm以上500～750個(gè)/m2。鮑苗入池后，每天升溫1℃，升到7.8℃恒溫流水培育，海水預(yù)熱后循環(huán)使用，循環(huán)量每天8倍以上。每天下午4：00～5：00投餌，海帶的投喂量為鮑體重的10%～20%。要根據(jù)水溫變化及幼鮑狀態(tài)隨時(shí)調(diào)節(jié)投喂量，避免投喂過多，浪費(fèi)餌料，影響水質(zhì)。發(fā)現(xiàn)鮑不上板，并出現(xiàn)死亡時(shí)，馬上更換波紋板和網(wǎng)箱。換下的器材和工具用50×10-6的高錳酸鉀消毒，消毒后在日光下曝曬2～3天后使用。發(fā)現(xiàn)鮑苗有病時(shí)，投喂藥餌或進(jìn)行藥浴：藥餌采用土霉素等藥品，將藥品溶解后混入餌料中投喂，2～3天為1療程;藥浴用四環(huán)素、鏈霉素等，一般5×10-6左右，藥浴時(shí)間至少6小時(shí)，藥浴時(shí)充氣。

2.結(jié)果

2.11999年培育雜交鮑苗情況

從附著到剝離(2～3mm)成活率40%。剝離后再培育，當(dāng)鮑苗規(guī)格達(dá)1cm以上時(shí)，再剝離，篩選分級(jí)，成活率達(dá)60%。經(jīng)多次篩選分級(jí)培育，共育1cm以上雜交鮑苗600萬(wàn)粒，單位水體出苗4286粒。1999年的試驗(yàn)證明了將本地皺紋盤鮑與日本盤鮑進(jìn)行雜交，能夠培育出具有雜種優(yōu)勢(shì)的子一代鮑苗，其性狀明顯優(yōu)于皺紋盤鮑自交培育的鮑苗，且雜交組合中以正交皺(♀)x日(♂)組合最好。

2.2 2000年培育雜交鮑苗情況

從附著到剝離(2～3mm)成活率達(dá)45%。剝離后再培育，當(dāng)鮑苗規(guī)格達(dá)1.0cm以上時(shí)，再剝離，篩選分級(jí)，成活率達(dá)65%，從7月中旬開始底播增殖小規(guī)格苗200余萬(wàn)粒，育出1cm以上商品鮑苗6加萬(wàn)粒。

雜交組與自交組受精率與孵化率基本相同，而附苗率與附苗后的成活率相差較大，其中正交皺(♀)×日(♂)較反交皺(♂)×日(♀)的雜交效果要好。從附著到2～3mm剝離，雜交組體現(xiàn)出附苗率和成活率高的明顯優(yōu)勢(shì)。

2.4 剝離后成活率及越冬中間培育成活率比較

至1999年8月中旬，鮑苗長(zhǎng)到1.5cm以上開始剝離篩選。

雜交苗僅10個(gè)池，篩選計(jì)數(shù)49.47萬(wàn)粒，成活率高達(dá)66.94%，其中1cm以上占45.79%。而自交組經(jīng)第1次剝離，進(jìn)入中問培育28萬(wàn)粒苗，到第2次剝離篩選只剩下1.74萬(wàn)粒，成活率僅為6.21%，規(guī)格達(dá)1cm以上，僅占13.79%。從越冬后成活率看，雜交苗成活率達(dá)95%，而自交為70%，相差25%。

2.5 雜交組與自交組生長(zhǎng)速度比較

從孵化至7月中旬，雜交組與自交組生長(zhǎng)速度差別不明顯。從7月中旬至越冬中間培育前的適溫生長(zhǎng)期，雜交組平均生長(zhǎng)速度明顯快于自交組，能相差0.5cm左右，至海上養(yǎng)成前，雜交組平均殼長(zhǎng)較自交組長(zhǎng)0.8cm左右。

3討論

3.1實(shí)踐表明，日本盤鮑同本地皺紋盤鮑只要親鮑規(guī)格適宜、貯養(yǎng)得當(dāng)，是可以實(shí)現(xiàn)同步產(chǎn)卵排精，并可順利受精孵化，培育出雜交子一代，不論正交或反交均可達(dá)到雜交育種的目的。我們根據(jù)兩者的生物學(xué)零度和成熟積溫不同，控制促熟的升溫幅度和天數(shù)，以便其能同步產(chǎn)卵排精。3.2經(jīng)過2年試驗(yàn)性生產(chǎn)，我們發(fā)現(xiàn)雜交組合所產(chǎn)生的后代，尤其是正交組合皺(♀)×日(♂)所產(chǎn)生的子代在抗病力、生長(zhǎng)速度、成活率等方面有著明顯的優(yōu)勢(shì)。自交組由于近親交配，在種質(zhì)上體現(xiàn)退化現(xiàn)象。因此通過雜交培育新品種是種質(zhì)優(yōu)化復(fù)壯的重要途徑。實(shí)踐證明，稚的剝離后30～60天，是死亡高峰期。因?yàn)閯冸x的機(jī)械損傷和此時(shí)正處于高溫期疾病多發(fā)期，很多場(chǎng)家鮑的自交后代由于抗病力差，剝離后30～60天，死亡率很高，至第2次剝離篩選成活率甚至低于10%。我們的自交試驗(yàn)也證明了這一點(diǎn)，而雜交組合的成活率高達(dá)60%，其抗病優(yōu)勢(shì)是顯而易見的。在海上養(yǎng)成階段，雜交組合所育鮑苗在抗病力、生長(zhǎng)速度方面明顯優(yōu)于自交組合，相對(duì)降低了生產(chǎn)成本，縮短了育苗養(yǎng)成周期。

3.32年的試驗(yàn)證明，用本地皺紋盤鮑同日本盤鮑雜交產(chǎn)生的子一代在性狀上明顯優(yōu)于自交鮑苗，但必須每年更新雜交親鮑，也就是說，雜交優(yōu)勢(shì)還不能在子二代身上穩(wěn)定表現(xiàn)。以雜交手段來進(jìn)一步提純復(fù)壯是十分復(fù)雜的工程，要經(jīng)過多代自交、回交等遺傳學(xué)方法，才能獲得性狀優(yōu)良穩(wěn)定的種質(zhì)，這需要運(yùn)用分子生物學(xué)手段和較長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行研究。

育種方法

一、以雜交方法培育優(yōu)良品種，或利用雜種優(yōu)勢(shì)的工作稱為雜交育種。雜交育種是水產(chǎn)生物育種的重要途徑之一，已經(jīng)在水產(chǎn)生物的品種改良和生產(chǎn)中發(fā)揮了巨大的作用。將來即使生物技術(shù)得已廣泛應(yīng)用，它也仍然是生物育種的基本途徑之一。

(一)雜交育種的原理

雜交生物學(xué)的特性是能急劇動(dòng)搖遺傳的保守性，使雜種的遺傳性富于游動(dòng)性，更具有可塑性。雜交可以使生物的遺傳物質(zhì)從一個(gè)群體(物種、亞種、品種或種群)轉(zhuǎn)移到另一群體，是增加生物變異性的一個(gè)重要方法。雜交并不產(chǎn)生新基因，而是利用現(xiàn)有生物資源的基因和性狀重新組8合，將分散于不同群體的基因組合在一起，建立合意的基因型和表型。因此，基本而言雜交育種乃是運(yùn)用遺傳的分離規(guī)律、自由組合規(guī)律連鎖互換規(guī)律來重建生物的遺傳性、創(chuàng)造理想變異體。

雜交可以依據(jù)雙方的親緣關(guān)系，分為種間雜交和種內(nèi)雜交。種間雜交包括亞科間和屬間雜交，種內(nèi)雜交又可分為近親交配、非親緣交配。近親繁殖能導(dǎo)致后代純合性增加，提高遺傳穩(wěn)定性，但是也能使某些有害隱性基因，從雜交狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榧兒蠣顟B(tài)而產(chǎn)生近交衰退。雜交系指種間雜交、種內(nèi)不同類群的雜交、不同品種以及一切非近親關(guān)系的交配。

一般說來，雜交難以表現(xiàn)出全新的性狀，但有可能出現(xiàn)部份新性狀，有的還能把雙親的優(yōu)良性狀綜合起來，部份或全部地表現(xiàn)出來，以致表現(xiàn)為介于雙親之間的中間性狀或雜種優(yōu)勢(shì)。魚類雜種經(jīng)電泳分析有來自雙親的成份，與缺少雙親某些成份與具有雙親以外的某些成份。

(二)雜交育種一般分為三種階段

雜交創(chuàng)新階段：這階段的任務(wù)是用兩個(gè)或兩個(gè)以上種群(或物種)雜交創(chuàng)造合意的變異體或雜種優(yōu)勢(shì)子代。為此，必須搜集有關(guān)資料、制訂育梗目標(biāo)、選擇雜交親鮑、確定雜交方式、正確使用人工雜交技術(shù)、觀測(cè)雜種性狀并推出合意變異體。

雜交育種目標(biāo)和現(xiàn)有水產(chǎn)資源的性狀情況而定，雜交雖然可以創(chuàng)造變異，但是這種變異是建立在基因重組和互相作用的基礎(chǔ)上不可能無中生有。雜交可以產(chǎn)生比雙親更高的性狀值，難以產(chǎn)生雙親所不具有的性狀，育種目標(biāo)不能脫離性狀的遺傳基礎(chǔ)。雜交親鮑的選擇必須有助于合意性狀的產(chǎn)生。為此，要做好兩項(xiàng)工作，一是選好雜交親鮑種群，使之具有育種目標(biāo)所需要全部性狀，而且遺傳構(gòu)成(如核型)是彼此協(xié)調(diào)和相容的。二是選擇好雜交親鮑的個(gè)體，使之具有育種目標(biāo)所需要之較突出性狀。鋻于親鮑種群的個(gè)體之間有差異，雜交一定要選用最好的個(gè)體。

(三)雜交育種方式

雜交方式是多種且多樣化的，可以通過單交進(jìn)行增殖雜交或經(jīng)濟(jì)雜交，也可以對(duì)單交種子代進(jìn)行回交，還可以采用復(fù)合雜交等方式來進(jìn)行。究竟采取何種交配方式，取決于雜種代的表現(xiàn)、可育性、育種目標(biāo)以及性狀的遺傳力。若是育種目標(biāo)性狀是由基因的非加性效應(yīng)造成，就只能采用經(jīng)濟(jì)雜交。倘若育種目標(biāo)性狀是由基因的加性效應(yīng)造成的，出現(xiàn)一定效果并且可育高，那么可以考慮采取增殖雜交或回交的方式。若是育種目標(biāo)能綜合三個(gè)以上種群，或物種的優(yōu)良性狀，而且所涉及的單交種子可以采取復(fù)合雜交。若是雜交育種的目標(biāo)性狀是質(zhì)量性狀，應(yīng)該參照性狀的遺傳規(guī)律及其所涉及的基因數(shù)目，采取增殖雜交或回交方式。確定雜交方式前，有時(shí)要做大量的雜交試驗(yàn)，從中比較配合力。

二、結(jié)論

雜交育種的方式很多，其目的在于作為育成新品種的雜交，包括育成雜交、級(jí)進(jìn)雜交、引入雜交、綜合雜交等，有些是為雜種一代優(yōu)勢(shì)利用的雜交，如經(jīng)濟(jì)雜交等等功能。雜交對(duì)于鮑魚的遺傳改造與創(chuàng)新品種等方面有積極性的意義，雜交是人類賴以生存獲取動(dòng)物性蛋白質(zhì)之重要方法，但也可為人類帶來不良后果，這些優(yōu)勢(shì)種可能獨(dú)占領(lǐng)域，其基因污染將是未來嚴(yán)重的遺傳后果，因此，我們不得不慎重正視科技為人類帶來另一負(fù)面影響。政府必須評(píng)估那些雜交種不得推廣，并制訂法律來約束嚴(yán)禁任意盲目地雜交品種，因而危害到其他原有在生種之滅絕。

雜交鮑魚，與皺紋盤鮑無大差異，其外殼呈翠綠色，皺紋突起明顯，呼吸孔多，生長(zhǎng)紋明顯。雜交鮑有效的提高了子代的抗逆性。成活率提高6-7倍，生長(zhǎng)周期縮短了一年，越冬成活率提高到90%，生長(zhǎng)速度提高30%，攝食量提高了70%。在5000m2水面中，出苗量5000頭/ m2 ，成活率達(dá)90%以上。分布于中國(guó)北部沿海，山東、遼寧產(chǎn)量較多，其中山東的威海、長(zhǎng)島，遼寧的金縣、長(zhǎng)山島產(chǎn)量最多。產(chǎn)季多在夏秋季節(jié)。鮑肉肥美，為海產(chǎn)中的珍品，多供應(yīng)高級(jí)賓館和出口。除鮮食外，亦可加工成罐頭或鮑魚干，售價(jià)均昂貴。鮑貝殼即有名的中藥石決明，又是制作貝雕畫的重要材料。

雜交鮑魚 - “大連1號(hào)”雜交鮑魚

由中國(guó)科學(xué)院海洋研究所張國(guó)范課題組主持研究的“大連1號(hào)”雜交鮑由全國(guó)水產(chǎn)原種和良種審定委員會(huì)審定為國(guó)家級(jí)新品種。國(guó)家農(nóng)業(yè)部為該品種頒發(fā)了新品種證書，認(rèn)定其為適宜推廣的雜交新品種，可在人工可控的水體中養(yǎng)殖。“大連1號(hào)”雜交鮑是我所培育的第一個(gè)國(guó)家級(jí)動(dòng)物新品種，也是我國(guó)第一個(gè)通過審定的海水貝類新品種。

“大連1號(hào)”雜交鮑魚是利用皺紋盤鮑日本巖手群體和大連群體雜交形成的雜交種。該雜交種雜種優(yōu)勢(shì)明顯，性狀穩(wěn)定，具有適應(yīng)性廣、成活率高、抗逆性強(qiáng)、生長(zhǎng)快、品質(zhì)好等特點(diǎn)。與父母本比較，生長(zhǎng)速度平均提高20%以上，成活率提高1.8 - 2.3倍，適宜水文0-29℃。與非雜交鮑魚相比較適溫上限提高了4-5℃，使雜交鮑養(yǎng)殖區(qū)海域從渤海和黃海北部向福建和廣東北部海域擴(kuò)展，養(yǎng)殖區(qū)域進(jìn)一步擴(kuò)大，經(jīng)濟(jì)效益將更加顯著。

雜交鮑魚 - 日本盤鮑與皺紋盤鮑雜交育種技術(shù)研究

目前皺紋盤鮑養(yǎng)殖生產(chǎn)中出現(xiàn)很多問題，突出表現(xiàn)為種質(zhì)嚴(yán)重退化，養(yǎng)成周期長(zhǎng)，成活率低，抗病力差，尤其是近幾年稚鮑病毒性和細(xì)菌性疾病大面積蔓延，造成稚鮑大批死亡，嚴(yán)重影響了鮑養(yǎng)殖生產(chǎn)的持續(xù)發(fā)展。分析原因，主要是過去人工育苗所采用的種鮑往往來自同一海區(qū)，經(jīng)多年繁衍，其親緣關(guān)系越來越近，產(chǎn)生近交衰退，造成種質(zhì)嚴(yán)重退化。因此，要使鮑養(yǎng)殖業(yè)得到穩(wěn)步發(fā)展，就要搞好種質(zhì)的優(yōu)化復(fù)壯。而利用雜交技術(shù)進(jìn)行種質(zhì)改良，培育出性狀穩(wěn)定、生長(zhǎng)快、抗病力強(qiáng)的鮑是這一產(chǎn)業(yè)的關(guān)鍵所在。利用日本盤鮑(haliotis)與本地皺紋盤鮑(H.discus hannai)進(jìn)行雜交育種技術(shù)研究取得了較好效果。研究情況總結(jié)如下：

1材料與方法

1.1材料

1.1.1親鮑來源

1999年1月下旬從大連長(zhǎng)海縣購(gòu)進(jìn)皺紋盤鮑親鮑1000頭，規(guī)格8cm以上，其中雌鮑450頭，雄鮑550頭。1999年2月13日從大連市水產(chǎn)研究所購(gòu)入日本盤鮑親的50頭，規(guī)格10cm以上，其中雌鮑22頭，雄鮑28頭.2000年1月20日從青島購(gòu)進(jìn)皺紋盤鮑1500頭規(guī)格8cm以上，其中雌鮑980頭，雄鮑520頭。2000年1月15日從日本青森縣購(gòu)進(jìn)日本盤鮑親的120頭，規(guī)格8.5cm，其中雌鮑58頭，雄鮑62頭。

1.1.2餌料

幼體培育用底棲硅藻和人工配合餌料，海上養(yǎng)成用鮮海帶、裙帶萊等。

1.1.3試驗(yàn)設(shè)備

刺激鮑產(chǎn)卵排精用的30w石英 紫外線燈管、水槽及采苗板。稚鮑中間培育用的網(wǎng)箱、黑色波紋板。養(yǎng)成用的海上筏架、養(yǎng)鮑籠等。

1.2方法

1.1.2餌料培育

先將培育池、采苗板洗刷干凈消毒，于前1年的11月份接種底棲硅藻，并逐步擴(kuò)大培養(yǎng)，到第2年4月初擴(kuò)大接種結(jié)束。每日換水2—3次，每次1/2～/3，水溫保持10～15℃，定期施肥(結(jié)合換水進(jìn)行)，氮、磷比為10∶1，適量補(bǔ)施鐵、硅肥等。為防止大型硅藻繁生，光照調(diào)在2500～3000lx范圍內(nèi)。定期倒轉(zhuǎn)采苗板方向，以促進(jìn)餌科均勻繁殖生長(zhǎng)。當(dāng)采苗板上出現(xiàn)撓足類繁殖，在培養(yǎng)池中加1～2×10-6的敵百蟲捕殺干凈。

1.1.2親鮑貯養(yǎng)促熟

親鮑自2月初入池促熟，培育密度30—50個(gè)/m3，親鮑入池后每天升溫1～1.5℃，升至20℃恒溫促熟，待產(chǎn)。每天全量換水1次，換水溫差不超過0.5℃，后期不超過0.3℃，并結(jié)合清除污物，糞便觀察性腺發(fā)育情況。每天上午換水結(jié)束后投入新餌料，以新鮮海帶為主，每天投喂量一般按親鮑體重的30%，同時(shí)結(jié)合水溫及攝食情況隨時(shí)加以調(diào)整。為了改善水質(zhì)，增加溶解氧，形成水流，有利于性腺的發(fā)育，促熟期間需要全天連續(xù)充氣，充氣量不少于1m3/小時(shí)。鮑具有背光性，暗光或黑暗狀態(tài)對(duì)親鮑的攝食、活動(dòng)有利，故一般光照控制在100lx以下。要保持室溫恒定，當(dāng)有效積溫達(dá)到300~400℃時(shí)，挑出雌、雄鮑，分別促熟暫養(yǎng)，每天做好有效積溫和攝食記錄。

1.2.3采卵、受精、孵化

1999年4月12日，貯養(yǎng)的皺紋盤鮑在有效積溫達(dá)800℃時(shí)自然產(chǎn)卵，日本盤鮑在有效積溫達(dá)到1250℃時(shí)，經(jīng)人工刺激后排精。5月3日通過人工刺激，促使皺紋盤鮑和日本盤鮑分別產(chǎn)卵、排精，進(jìn)行正向雜交。5月15日和6月2日亦以刺激法誘導(dǎo)日本盤鮑和皺紋盤鮑產(chǎn)卵、排精，進(jìn)行反向雜交。將采集的卵子集中定量，待卵下沉后排掉上層清水，然后按每個(gè)卵子10000個(gè)左右精于加入受精，邊加精邊攪動(dòng)海水，半分鐘受精結(jié)束，用新鮮過濾海水洗卵數(shù)次，以除去多余精子。然后，將受精卵移入孵化池，放卵密度為20～30個(gè)/ml，在胚體上浮前每6～8小時(shí)換水1次，每次3/4，水溫保持18～20℃。

1.2.4采苗、稚鮑前期培育

將后期面盤幼體每筐架投放1萬(wàn)～l.5萬(wàn)個(gè)，3天后附著結(jié)束，附苗率為30%左右，平均每張采苗板附著量為200～300個(gè)。稚鮑前期培育確保水質(zhì)優(yōu)良，每天換水3次，每次的交換量為培育水體的8倍以上，前期水流要緩，待全部附著后適當(dāng)增加流量。水溫為18～20℃。為使底棲硅藻不斷增殖，以保證幼鮑餌料供應(yīng)，每天清晨結(jié)合換水施以氮1×10-6、磷0.1×10-6。光照控制在1500～3000lx。

1.2.5稚鮑后期培育

附苗后35天左右，稚鮑規(guī)格達(dá)2～3mm時(shí)，逐步剝離并轉(zhuǎn)移到網(wǎng)箱培育。剝離方法用2%的酒精海水麻醉法。剝離后，1天24小時(shí)常流水，流水量為10個(gè)量程以上。投人工配合餌料，每天傍晚前投喂1次，投喂量根據(jù)稚鮑攝食情況隨時(shí)調(diào)整。每天清晨堅(jiān)持清污，除去殘餌和死苗，定期倒池，洗刷網(wǎng)箱。稚鮑人箱后約2個(gè)月以上，平均殼長(zhǎng)9mm左右，由于個(gè)體間出現(xiàn)較大差異，此時(shí)進(jìn)行剝離篩選分級(jí)，選用2級(jí)網(wǎng)目的篩網(wǎng)，1次分離出3種體長(zhǎng)規(guī)格，將大、中、小個(gè)體分開單獨(dú)飼養(yǎng)。

1.2.6鮑的中間育成

當(dāng)年11月份水溫6～8℃，剝離篩選殼長(zhǎng)<1cm、殼長(zhǎng)1～1.5cm和1.5～2cm、2～2.5cm以及3cm以上5種規(guī)格，進(jìn)行室內(nèi)水泥池越冬中間育成。中間育成密度與鮑苗大小有關(guān)：殼長(zhǎng)<1cm，中間育成密度3000～4000個(gè)/m2;殼長(zhǎng)1～1.5cm，密度2000～2500個(gè)/m2;殼長(zhǎng)1.5～2cm，密度為1000～1500個(gè)/m2;殼長(zhǎng)2～2.5cm，密度為750～1000個(gè)/m2;2.5cm以上500～750個(gè)/m2。鮑苗入池后，每天升溫1℃，升到7.8℃恒溫流水培育，海水預(yù)熱后循環(huán)使用，循環(huán)量每天8倍以上。每天下午4：00～5：00投餌，海帶的投喂量為鮑體重的10%～20%。要根據(jù)水溫變化及幼鮑狀態(tài)隨時(shí)調(diào)節(jié)投喂量，避免投喂過多，浪費(fèi)餌料，影響水質(zhì)。發(fā)現(xiàn)鮑不上板，并出現(xiàn)死亡時(shí)，馬上更換波紋板和網(wǎng)箱。換下的器材和工具用50×10-6的高錳酸鉀消毒，消毒后在日光下曝曬2～3天后使用。發(fā)現(xiàn)鮑苗有病時(shí)，投喂藥餌或進(jìn)行藥浴：藥餌采用土霉素等藥品，將藥品溶解后混入餌料中投喂，2～3天為1療程;藥浴用四環(huán)素、鏈霉素等，一般5×10-6左右，藥浴時(shí)間至少6小時(shí)，藥浴時(shí)充氣。

2.結(jié)果

2.11999年培育雜交鮑苗情況

從附著到剝離(2～3mm)成活率40%。剝離后再培育，當(dāng)鮑苗規(guī)格達(dá)1cm以上時(shí)，再剝離，篩選分級(jí)，成活率達(dá)60%。經(jīng)多次篩選分級(jí)培育，共育1cm以上雜交鮑苗600萬(wàn)粒，單位水體出苗4286粒。1999年的試驗(yàn)證明了將本地皺紋盤鮑與日本盤鮑進(jìn)行雜交，能夠培育出具有雜種優(yōu)勢(shì)的子一代鮑苗，其性狀明顯優(yōu)于皺紋盤鮑自交培育的鮑苗，且雜交組合中以正交皺(♀)x日(♂)組合最好。

2.2 2000年培育雜交鮑苗情況

從附著到剝離(2～3mm)成活率達(dá)45%。剝離后再培育，當(dāng)鮑苗規(guī)格達(dá)1.0cm以上時(shí)，再剝離，篩選分級(jí)，成活率達(dá)65%，從7月中旬開始底播增殖小規(guī)格苗200余萬(wàn)粒，育出1cm以上商品鮑苗6加萬(wàn)粒。

雜交組與自交組受精率與孵化率基本相同，而附苗率與附苗后的成活率相差較大，其中正交皺(♀)×日(♂)較反交皺(♂)×日(♀)的雜交效果要好。從附著到2～3mm剝離，雜交組體現(xiàn)出附苗率和成活率高的明顯優(yōu)勢(shì)。

2.4 剝離后成活率及越冬中間培育成活率比較

至1999年8月中旬，鮑苗長(zhǎng)到1.5cm以上開始剝離篩選。

雜交苗僅10個(gè)池，篩選計(jì)數(shù)49.47萬(wàn)粒，成活率高達(dá)66.94%，其中1cm以上占45.79%。而自交組經(jīng)第1次剝離，進(jìn)入中問培育28萬(wàn)粒苗，到第2次剝離篩選只剩下1.74萬(wàn)粒，成活率僅為6.21%，規(guī)格達(dá)1cm以上，僅占13.79%。從越冬后成活率看，雜交苗成活率達(dá)95%，而自交為70%，相差25%。

2.5 雜交組與自交組生長(zhǎng)速度比較

從孵化至7月中旬，雜交組與自交組生長(zhǎng)速度差別不明顯。從7月中旬至越冬中間培育前的適溫生長(zhǎng)期，雜交組平均生長(zhǎng)速度明顯快于自交組，能相差0.5cm左右，至海上養(yǎng)成前，雜交組平均殼長(zhǎng)較自交組長(zhǎng)0.8cm左右。

3討論

3.1實(shí)踐表明，日本盤鮑同本地皺紋盤鮑只要親鮑規(guī)格適宜、貯養(yǎng)得當(dāng)，是可以實(shí)現(xiàn)同步產(chǎn)卵排精，并可順利受精孵化，培育出雜交子一代，不論正交或反交均可達(dá)到雜交育種的目的。我們根據(jù)兩者的生物學(xué)零度和成熟積溫不同，控制促熟的升溫幅度和天數(shù)，以便其能同步產(chǎn)卵排精。3.2經(jīng)過2年試驗(yàn)性生產(chǎn)，我們發(fā)現(xiàn)雜交組合所產(chǎn)生的后代，尤其是正交組合皺(♀)×日(♂)所產(chǎn)生的子代在抗病力、生長(zhǎng)速度、成活率等方面有著明顯的優(yōu)勢(shì)。自交組由于近親交配，在種質(zhì)上體現(xiàn)退化現(xiàn)象。因此通過雜交培育新品種是種質(zhì)優(yōu)化復(fù)壯的重要途徑。實(shí)踐證明，稚的剝離后30～60天，是死亡高峰期。因?yàn)閯冸x的機(jī)械損傷和此時(shí)正處于高溫期疾病多發(fā)期，很多場(chǎng)家鮑的自交后代由于抗病力差，剝離后30～60天，死亡率很高，至第2次剝離篩選成活率甚至低于10%。我們的自交試驗(yàn)也證明了這一點(diǎn)，而雜交組合的成活率高達(dá)60%，其抗病優(yōu)勢(shì)是顯而易見的。在海上養(yǎng)成階段，雜交組合所育鮑苗在抗病力、生長(zhǎng)速度方面明顯優(yōu)于自交組合，相對(duì)降低了生產(chǎn)成本，縮短了育苗養(yǎng)成周期。

3.32年的試驗(yàn)證明，用本地皺紋盤鮑同日本盤鮑雜交產(chǎn)生的子一代在性狀上明顯優(yōu)于自交鮑苗，但必須每年更新雜交親鮑，也就是說，雜交優(yōu)勢(shì)還不能在子二代身上穩(wěn)定表現(xiàn)。以雜交手段來進(jìn)一步提純復(fù)壯是十分復(fù)雜的工程，要經(jīng)過多代自交、回交等遺傳學(xué)方法，才能獲得性狀優(yōu)良穩(wěn)定的種質(zhì)，這需要運(yùn)用分子生物學(xué)手段和較長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行研究。

雜交鮑魚 - 雜交育種

一、以雜交方法培育優(yōu)良品種，或利用雜種優(yōu)勢(shì)的工作稱為雜交育種。雜交育種是水產(chǎn)生物育種的重要途徑之一，已經(jīng)在水產(chǎn)生物的品種改良和生產(chǎn)中發(fā)揮了巨大的作用。將來即使生物技術(shù)得已廣泛應(yīng)用，它也仍然是生物育種的基本途徑之一。

(一)雜交育種的原理

雜交生物學(xué)的特性是能急劇動(dòng)搖遺傳的保守性，使雜種的遺傳性富于游動(dòng)性，更具有可塑性。雜交可以使生物的遺傳物質(zhì)從一個(gè)群體(物種、亞種、品種或種群)轉(zhuǎn)移到另一群體，是增加生物變異性的一個(gè)重要方法。雜交并不產(chǎn)生新基因，而是利用現(xiàn)有生物資源的基因和性狀重新組8合，將分散于不同群體的基因組合在一起，建立合意的基因型和表型。因此，基本而言雜交育種乃是運(yùn)用遺傳的分離規(guī)律、自由組合規(guī)律連鎖互換規(guī)律來重建生物的遺傳性、創(chuàng)造理想變異體。

雜交可以依據(jù)雙方的親緣關(guān)系，分為種間雜交和種內(nèi)雜交。種間雜交包括亞科間和屬間雜交，種內(nèi)雜交又可分為近親交配、非親緣交配。近親繁殖能導(dǎo)致后代純合性增加，提高遺傳穩(wěn)定性，但是也能使某些有害隱性基因，從雜交狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榧兒蠣顟B(tài)而產(chǎn)生近交衰退。雜交系指種間雜交、種內(nèi)不同類群的雜交、不同品種以及一切非近親關(guān)系的交配。

一般說來，雜交難以表現(xiàn)出全新的性狀，但有可能出現(xiàn)部份新性狀，有的還能把雙親的優(yōu)良性狀綜合起來，部份或全部地表現(xiàn)出來，以致表現(xiàn)為介于雙親之間的中間性狀或雜種優(yōu)勢(shì)。魚類雜種經(jīng)電泳分析有來自雙親的成份，與缺少雙親某些成份與具有雙親以外的某些成份。

(二)雜交育種一般分為三種階段

雜交創(chuàng)新階段：這階段的任務(wù)是用兩個(gè)或兩個(gè)以上種群(或物種)雜交創(chuàng)造合意的變異體或雜種優(yōu)勢(shì)子代。為此，必須搜集有關(guān)資料、制訂育梗目標(biāo)、選擇雜交親鮑、確定雜交方式、正確使用人工雜交技術(shù)、觀測(cè)雜種性狀并推出合意變異體。

雜交育種目標(biāo)和現(xiàn)有水產(chǎn)資源的性狀情況而定，雜交雖然可以創(chuàng)造變異，但是這種變異是建立在基因重組和互相作用的基礎(chǔ)上不可能無中生有。雜交可以產(chǎn)生比雙親更高的性狀值，難以產(chǎn)生雙親所不具有的性狀，育種目標(biāo)不能脫離性狀的遺傳基礎(chǔ)。雜交親鮑的選擇必須有助于合意性狀的產(chǎn)生。為此，要做好兩項(xiàng)工作，一是選好雜交親鮑種群，使之具有育種目標(biāo)所需要全部性狀，而且遺傳構(gòu)成(如核型)是彼此協(xié)調(diào)和相容的。二是選擇好雜交親鮑的個(gè)體，使之具有育種目標(biāo)所需要之較突出性狀。鋻于親鮑種群的個(gè)體之間有差異，雜交一定要選用最好的個(gè)體。

(三)雜交育種方式

雜交方式是多種且多樣化的，可以通過單交進(jìn)行增殖雜交或經(jīng)濟(jì)雜交，也可以對(duì)單交種子代進(jìn)行回交，還可以采用復(fù)合雜交等方式來進(jìn)行。究竟采取何種交配方式，取決于雜種代的表現(xiàn)、可育性、育種目標(biāo)以及性狀的遺傳力。若是育種目標(biāo)性狀是由基因的非加性效應(yīng)造成，就只能采用經(jīng)濟(jì)雜交。倘若育種目標(biāo)性狀是由基因的加性效應(yīng)造成的，出現(xiàn)一定效果并且可育高，那么可以考慮采取增殖雜交或回交的方式。若是育種目標(biāo)能綜合三個(gè)以上種群，或物種的優(yōu)良性狀，而且所涉及的單交種子可以采取復(fù)合雜交。若是雜交育種的目標(biāo)性狀是質(zhì)量性狀，應(yīng)該參照性狀的遺傳規(guī)律及其所涉及的基因數(shù)目，采取增殖雜交或回交方式。確定雜交方式前，有時(shí)要做大量的雜交試驗(yàn)，從中比較配合力。

二、結(jié)論

雜交育種的方式很多，其目的在于作為育成新品種的雜交，包括育成雜交、級(jí)進(jìn)雜交、引入雜交、綜合雜交等，有些是為雜種一代優(yōu)勢(shì)利用的雜交，如經(jīng)濟(jì)雜交等等功能。雜交對(duì)于鮑魚的遺傳改造與創(chuàng)新品種等方面有積極性的意義，雜交是人類賴以生存獲取動(dòng)物性蛋白質(zhì)之重要方法，但也可為人類帶來不良后果，這些優(yōu)勢(shì)種可能獨(dú)占領(lǐng)域，其基因污染將是未來嚴(yán)重的遺傳后果，因此，我們不得不慎重正視科技為人類帶來另一負(fù)面影響。政府必須評(píng)估那些雜交種不得推廣，并制訂法律來約束嚴(yán)禁任意盲目地雜交品種，因而危害到其他原有在生種之滅絕。

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